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近日，丰乐香料与浙江工业大学联合申请的一项发明专利“一种对硝基苄基酯酶突变体及应用（ZL202110465504.0）”获得国家知识产权局授权。
该技术主要应用于消旋薄荷醇的拆分以获取L-薄荷醇，通过对野生型对硝基苄基酯酶进行定点饱和突变获得突变体，在不添加助溶剂的情况下，实现酶催化活性维持在较高水平，突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。
国家知识产权局官网上的发明摘要显示，将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl?乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l?薄荷醇，结果表明l?乙酸薄荷酯底物转化率>70꧋％，产物l?薄荷醇的eep值>95％，表现出良好的工业应用性能。
本发明采用的野生型对硝基苄基酯酶(PNB)来源于枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)CGMCC No.17904(CN 110373366 A)，可对dl-薄荷酯实现高效手性拆分，用于制备l-薄荷醇，特别是其水解速率快，dl-薄荷酯底物投料量高。但是，该酶催化过程中需添加助溶剂如丁醇或乙醇，用来提高底物的立体选择性。若在无助溶剂体系下，酶催化的底物立体选择性较低。而在催化体系中添加有机溶剂，不但增加了生产成本，也增加了产物l-薄荷醇分离纯化的难度。本发明通过对野生型酶的突变改♚造，提高了酶在无助溶剂体系中的催化速率，同时显著提高其在无助溶体系下对底物的立体选择性。
丰乐称，该项发明专利优化了传统工艺路线，得到了高纯度的薄荷醇产品，可以满足不同客户对生物拆分法获取L-薄荷醇的需求🌌。
薄荷醇是目前需求量最大的环状单萜烯醇类香料，它一共有8种同分异构体，其中l-薄荷醇具有的独特薄荷香气和清凉效果，具有兴奋、杀菌镇痛、止痒、芳香清凉等功能，使得它在各产业中有非常广泛的应🀅用，如食品，烟草，化妆品，口腔保健等产品。其也被广泛用于镇痛剂、局部麻醉剂等医药品以及作为手性化合物合成前体和辅助试剂等。
l-薄荷醇的生产方法包括植物提取法、化学合成法和生物酶手性拆分法等。相较前两种方法，生物酶法拥有反𒈔应温和，原料价廉易得，对环境友好等优点，因此推动了研究者对生物法手性拆分的♕研究。
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